美國NIST的 IgG1κ 單克隆抗體 標準物質(zhì)（RM 8671）主要用于評估確定單克隆抗體的物理化學和生物物理屬性的方法的性能。它還為開發(fā)用于治療性蛋白質(zhì)表征的新技術(shù)提供了一個具有代表性的測試分子。此外IgG1κ 單克隆抗體 標準物質(zhì)（RM 8671）可用于多種用途，包括系統(tǒng)適用性測試、確定方法或儀器性能和可變性、比較變化的分析測試方法以及協(xié)助方法鑒定。

包裝規(guī)格：

         RM8671由一個內(nèi)螺紋聚丙烯冷凍管組成，其中含有 800 µL 10 mg/mL NIST IgG1κ 單克隆抗體 (NISTmAb)，溶于 12.5 mmol/L L-組氨酸、12.5 mmol/L L-組氨酸 HCl (pH 6.0) ）。

        美國NIST的gG1κ 單克隆抗體 標準物質(zhì)（RM 8671）是一種在鼠懸浮培養(yǎng)中表達的重組人源化 IgG1κ，并經(jīng)過生物制藥行業(yè)標準的上游和下游純化，以去除工藝相關(guān)的雜質(zhì)。它是通過鏈間和鏈內(nèi)二硫鍵連接的兩條輕鏈和兩條重鏈亞基的約 150 kDa 同源二聚體。該分子具有高豐度的 N 末端焦谷氨酰胺化、C 末端賴氨酸剪切和重鏈糖基化。該蛋白質(zhì)還具有低豐度的翻譯后修飾，包括蛋氨酸氧化、脫酰胺和糖化 [1-4]。這些和其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性在 ACS Symposium 系列中針對第一批臨時材料進行了廣泛的描述，在本文中用作主要樣品 (PS) [5-7]。

有效期：非認證值在規(guī)定的測量不確定度內(nèi)有效，直到 2026 年 4 月 29 日。如果材料存儲或使用不當、損壞、污染或以其他方式修改，則賦值無效。

非認證值：NIST 非認證值是基于當前可用信息的最佳估計值，從 1987 年到 2020 年 7 月被稱為“參考值"或“信息值"[8]。非認證值適用于方法開發(fā)、方法協(xié)調(diào)和過程控制，但不提供對國際單位制 (SI) 或其他高階參考系統(tǒng)的計量溯源。

表 1 至表 5 中提供了 IgG1κ 單克隆抗體 標準物質(zhì)（RM 8671）的非認證值。此 RMIS 中描述的特定協(xié)議和結(jié)果的全面擴展可在參考文獻 [9-13] 中找到。質(zhì)量濃度非認證值：表 1 中列出的質(zhì)量濃度值基于在 280 nm 處測得的十進制衰減 D。十進制衰減 D 被計算為透射率的負對數(shù)（以 10 為底），它類似于吸光度，除了包含對離開樣品的輻射功率的散射和發(fā)光效應 [14]。 NISTmAb 的濃度通過使用 1.42 mL · mg-1 · cm-1 [15,16] 的理論消光系數(shù) (ε) 確定。該值是根據(jù) [16] 報告的方法計算的，并進一步校正了 0.977 [15] 的聚糖質(zhì)量分數(shù)校正因子。可以在參考文獻 [9] 中找到分析方法的詳細信息以及對與此質(zhì)量濃度測量相關(guān)的不確定性的貢獻。

物理化學非認證值：IgG1κ 單克隆抗體 標準物質(zhì)（RM 8671）的物理化學屬性使用合格的尺寸排阻色譜 (SEC)、毛細管十二烷基硫酸鈉電泳 (CE-SDS)、毛細管區(qū)帶電泳 (CZE) 和動態(tài)光散射 (DLS) 方法進行測量 [10 ,11]。使用原始樣品 (PS) 對這些分析測定進行了鑒定，以建立方法性能標準。資格驗證活動以 ICH Q2(R1) 方法驗證指南為模型，包括評估線性、檢測限 (LOD)/定量限 (LOQ)、范圍和精密度（可重復性和一些中間精密度）。表 2、3、4 和 5 中提供的物理化學值是通過使用每種合格方法（SEC、CE-SDS、DLS 和 CZE）分析 Lot 14HB-D-002 來認定的，同時用儀器認證 (IQ) 括起每個分析標準和 PS 以確保系統(tǒng)適用性。 IQ 標準和 PS 都需要通過從方法鑒定得出的預定義方法性能標準。可以在參考文獻 [9-11] 中找到分析方法的詳細信息以及對與測量相關(guān)的不確定性的貢獻。在參考文獻 [9-13] 中可以找到關(guān)于物理化學測量的特定協(xié)議和結(jié)果的全面擴展。

附加信息：包括流動成像分析和肽圖鑒定測試在內(nèi)的附加物理化學表征方法也適用于 RM 8671，并在附錄 A 中報告。

儲存：RM 用干冰運輸，運輸過程中應保持冷凍狀態(tài)。材料應在收到后立即在 -80 °C 下冷凍保存。對一系列穩(wěn)定性樣品進行了評估，以確定最佳的儲存條件，在該條件下，樣品可能會在給定的方法中保持其物理化學性能 [9]。在所有情況下，最好將材料儲存在 -80 °C。如果需要在 -80 °C 以外的條件下制備和/或儲存等分試樣，則在給定條件和某些預期用途下推薦的最長儲存時間列于表 6。

處理和使用說明：應將小瓶從 -80 °C 冰箱中取出，在室溫下解凍約 30 分鐘或直至沒有殘留冰晶。一旦解凍，小瓶應輕輕倒置五次，以減輕冷凍過程中可能形成的任何濃度梯度。然后，小瓶應在微型離心機中快速旋轉(zhuǎn)，以沉淀任何可能仍粘附在小瓶蓋或內(nèi)螺紋上的溶液。一旦打開，小瓶內(nèi)容物應立即使用和/或根據(jù)材料的預期用途在表 6 中列出的預定義條件下儲存。可以通過轉(zhuǎn)移等分試樣并稀釋至適當體積來制備較低濃度的蛋白質(zhì)溶液。 RM 不提供稀釋劑；然而，可以使用含水稀釋劑，例如制劑緩沖液（12.5 mmol/L L-組氨酸，12.5 mmol/L L-組氨酸 HCl，pH 6.0）。 NIST 尚未在稀釋或濃縮條件下對材料的溶解度和穩(wěn)定性進行全面測試，因此可能不符合本文所述分析測定的預期。